X-gal染色 for tissue

年 月 日                   イニシャル

サンプル                       総数   

1: PBS

2: Prefixative

 final stock        チェック欄

1%ホルムアルデヒド 37% 2.7ml □

0.2%グルタールアルデヒド 25% 0.8ml □

2mM MgCl2 1M 0.2ml □

5mM EGTA 200mM 2.5ml □

0.02% NP40 10% 0.2ml

100ml in PBS

3: 0.02% NP40 (PBS 100ml + 10%NP40 0.2ml)

4: Staining solution

final stock  チェック欄

5mMフェリシアン化カリウム 100mM 2.5ml

 5mMフェロシアン化カリウム 100mM 2.5ml

 2mM MgCl2 1M 0.1ml

0.01% Sodium Deoxycholate 10% 0.05ml

0.02% NP40 10% 0.1ml

1mg/ml X-gal 50mg/ml 1ml

50ml in PBS 直ちにアルミホイルで遮光。

 

 

 

K3[Fe(CN)6] = 329.25

100mM50ml の作り方。

  329.25 × 100/1000 M × 50/1000 L = 1.646g DWに溶かして50mlとする。

フェロシアン化カリウム・Potassium Ferrocyanide 【和光純薬 161-03742

K4[Fe(CN)6]3H2O = 422.39

100mM50ml の作り方。

  422.39 × 100/1000 M × 50/1000 L = 2.112g DWに溶かして50mlとする。

4%パラホルムアルデヒド 50ml (用事調整)

  300ml の三角フラスコに、PBS 50ml + PFA 2gを電子レンジで約1分。

  透明になればOK。→ On ice 4℃。