マウスtailからgenomic DNAの抽出（DNAeasy Tissue Kit を用いて）

平成　年　月　日　　 イニシャル　

サンプル 総数　　　

0. Buffer ATLとProteinase Kを混ぜる。ATLが固まっているか、白く濁っていたら、

　　お湯等で温める

Buffer ATL 180 μl ×（　　　）＝　　　μl

Proteinase K 20 μl ×（　　　）＝　　　μl

　　総数+1（例えば11ヶの時は12）

1. 　0.4-0.6 cm位の尾を1.5mlのエッペンドルフチューブへ

2. 　「ステップ0. の混合液」を200μlづつチューブへ入れる。

55℃でover night.（　月　日　時　分　→　月　日　時　分）

時々vortexする。

3-1. 15秒間Vortex.

3-2. Buffer ALとEthanolを混ぜる（15ml conical tube ３ヶ月は安定@RT）。

Buffer AL 7ml

Ethanol 7ml

3-3. Buffer AL-Ethanol混合液を400μlづつ加えて15秒間Vortex

⇒　14,000回転5分

4. 「ステップ3-3.の混合物」をDNAeasy mini columnへ。

下に2ml collection tube(キット付属)を添える。

⇒　8000回転1分

5. カラムを新しい2ml collection tube(キット付属)に移す。

　　 ⇒Buffer AW1を500μlづつ加える。

⇒　8,000回転1分

6. カラムを新しい2ml collection tube(キット付属)に移す。

　　 ⇒Buffer AW2を500μlづつ加える。

⇒　14,000回転3分

⇒　そっと取り出す

7. カラムを新しい1.5mlのエッペンドルフチューブに移す。

　　 ⇒Buffer AEを100μlづつ加える。

⇒ 1分@RT

⇒　8000回転1分

8. Flow-throughがgenomic DNA

⇒ PCR

⇒ save　 @-20℃（通常）または、@　4℃　(1日間)。